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數(shù)字PCR在HBV-DNA中的應用

點擊次數(shù):2690 更新時間:2021-09-23

Droplet數(shù)字PCR是一種新興的高靈敏度核酸定量方法,正越來越多地應用于臨床病毒學領域,包括乙型肝炎病毒(HBV)的檢測。在此,我們綜合報道了一種可靠的、重復性好的ddPCR方法,用于血清HBV-DNA的高靈敏定量。概率分析檢測限為4拷貝/ml(<1IU/ml),線性關系良好(R2=0.94),批內(nèi)、批間重復性好,同一批和兩批獨立批之間的差值分別不超過0.14logCopies/mL和0.21logCopies/mL。通過分析慢性HBV感染患者(大多數(shù)正在接受抗病毒治療)的血清樣本,ddPCR成功地定量了89.8%的血清HBV-DNA<20IU/mL[相當于<112拷貝/ml]的血清HBV-DNA,中位數(shù)(IQR)為8(5-14)IU/mL[45(28-78)拷貝/ml],在66.7%的血清HBV-DNA檢測不到的患者中,中位數(shù)(IQR)為5.01IU/mL(相當于<112copy/ml),其中99.8%的患者血清HBV-DNA可檢測到<20IU/mL[相當于<112拷貝/ml],中位數(shù)(IQR)為8(5-14)IU/mL[45(28-78)拷貝/ml]。同樣,通過分析血清學特征與隱匿性HBV感染相適應的患者(抗HBc+/HBsAg-)的血清樣本,ddPCR成功地定量了40%患者的血清HBV-DNA,中位數(shù)(IQR)為1(1-2)IU/mL[5(5-11)拷貝/ml],這與隱匿性HBV感染中通常觀察到的極其有限的病毒復制一致。總體而言,血清HBV-DNA高靈敏定量檢測的可用性可以為優(yōu)化隱匿性乙型肝炎感染的診斷、改善慢性HBV感染患者的治療管理提供附加值,也可以根據(jù)旨在實現(xiàn)HBV功能性治愈的創(chuàng)新藥物(即將投入臨床實踐)提供附加值。



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